Mixosarcomul uterin primar cu metastază generalizată la iepuri (raport de caz patologic)

(Un caz de mixosarcom uterin primar cu metastază generalizată la iepure. Raport de caz patologic

Rezumat. Autorii au descris un caz de mixosarcom uterin primar la o carcasă de iepure de rasă mixtă de 4 ani, supraponderală, de culoare gri, care a fost găsită în timpul unui examen patologic. Tumora mezenchimală malignă s-a dezvoltat din uterul stâng și a făcut metastaze solitare paratumourale în ligamentul larg al uterului și metastaze multiple îndepărtate în peritoneul visceral și plămâni. Examenul histopatologic al tumorilor primare și secundare a arătat o neoangiogeneză indusă de tumori crescută, hemoragie extinsă și necroză. La iepurele obezi, ficatul gras necrobiotic patologic sever, atrofia și lipomatoza pancreasului, s-au observat în plus liponecroza în oment. Tumorile primare și secundare au prezentat pozitivitate vimentină și negativitate pancitokeratină, α-SMA-, claudină-5. Indicele de etichetare Ki-67 a prezentat 18%. Autorii au presupus că cauzele coagulopatiei intravasculare diseminate la iepure au fost hemoragia extinsă, necroza tumorilor, liponecroza omentului indusă de tumoră și cetoza.)

Mixosarcomul sau sarcomul mixoid este o tumoare malignă de origine mezenchimală caracterizată prin prezența fibroblastelor pleomorfe nediferențiate și producția semnificativă de mucină extracelulară (mucină). Caracteristicile histopatologice ale tumorii sunt celule de țesut conjunctiv tumoral în formă de stea și de fus încorporate într-o stromă bogată în mucus care formează o rețea de celule libere și se caracterizează prin polimorfism nuclear ușor până la moderat (anisonucleoză) și activitate mitotică moderată (22)., 24, 25).

La iepuri, au fost raportate mixosarcom cutanat al gâtului, umerilor, pieptului, abdomenului și membrelor posterioare de la nivelul pielii (25), precum și mixosarcomul metastatic cauzat de virusul oncogen asemănător poxvirusului (6, 20, 21) și cavităților americane literatura veterinară. mixosarcomul subcutanat al măduvei spinării lombare a fost descris la iepuri (19).

În studiul nostru de caz, un mixosarcom din uter și metastaze din organism a fost detectat prin examinarea histopatologică și imunohistochimică a unui iepure domestic de sex feminin mixt, gri, de 4 ani, nullipara. Până în prezent, un tip histologic de tumoră uterină primară la iepuri a fost descris în literatura veterinară (16).

Material și metodă

Istoricul medical

În septembrie 2011, a fost dusă moartă la o clinică pentru animale de companie de către o iepuroaică de 4 ani, gri, mixtă. Potrivit proprietarului, animalul a avut dificultăți de respirație în zilele anterioare morții, nu a mâncat și și-a pierdut interesul pentru mediul său. Iepurele nu fusese vaccinat și nu era însărcinată în timpul vieții sale. A fost ținut singur într-o cușcă, a hrănit alimente pentru iepuri, fân de luncă, pâine uscată și legume.

Cadavrul a fost transportat la Departamentul de patologie și medicină veterinară criminalistică din SZIE-ÁOTK pentru examinare.

Examinări patologice și histopatologice

În examinarea post-mortem, probele au fost colectate din diferite leziuni de organe ale carcasei, care au fost conservate la temperatura camerei timp de 24 de ore în soluție de formaldehidă tamponată 8% (PBS, pH 7,0). Probele de țesut astfel obținute au fost făcute adecvate pentru prelucrarea ulterioară cu o mașină de preparare a țesutului excesior Shandon. Mașina automată de preparare a țesăturii, în timpul programului său de 14 ore, după o serie de alcool ascendent în 6 pași (4x1 oră, apoi 2x1,5 ore) și o serie de xilen ascendent în 3 trepte (3x1 oră) în 3 pași (3x80 minute) cu parafină de 60 ºC (ceară de parafină peletizată cu histoplast Shandon) a contaminat probele. Pregătirea țesutului a fost urmată de încorporarea parafinei. Secțiunile cu grosimea de 3-4 μm au fost preparate din blocuri de parafină convenționale și colorate cu hematoxilină și eozină folosind o mașină de colorat automată Shandon Varistain 24-4. Secțiunile au fost analizate folosind un microscop optic Nikon Optiphot-2.

Ulterior, pentru studii imunohistochimice, secțiunile au fost deparafinizate de două ori în xilen (2x10 min), apoi de trei ori în alcool (100%, 70% și 50% alcool timp de 3x5 min) și apoi tratate cu 1x PBS. Digestia antigenului a fost efectuată după spălat. Antigenii au fost detectați la temperatură ridicată într-un cuptor cu microunde (30 min, 800 W) suplimentat cu soluție de recuperare țintă (DAKO; Glostrup, Danemarca, pH 6). Activitatea endogenă a peroxidazei a fost blocată cu 0,3% H2O2 în metanol timp de 5 minute. Următorii anticorpi au fost utilizați pentru experimentele noastre: antivimentină (anticorp monoclonal de șoarece, diluție 1: 200), actină musculară anti-α-α-SMA (anticorp monoclonal de șoarece, diluție 1: 8000, Sigma, DAKO), anticitokeratină AE1 AE3 (anticorp monoclonal de șoarece), diluție 1: 100, DAKO), anti-Ki-67 (anticorp monoclonal de șoarece, diluție 1: 100, DAKO) și anticlaudin-5 (anticorp monoclonal de șoarece, diluție 1: 100, Zymed Inc.) . Reacțiile imunohistochimice au fost vizualizate cu sistemul avidin-biotin imunoperoxidază (kit DAKO LSAB2) și cromogen DAB (diaminobenzidină). Colorarea cu contrast a fost efectuată cu hemalaunul lui Mayer. S-au pregătit secțiuni de control negative omițând anticorpii primari.

În evaluarea reacțiilor imunohistochimice, angiolomiomul degu uterin a fost utilizat ca control pozitiv extern pentru vimentină, α-SMA, Ki-67 și respectiv claudin-5 (7). carcinom colangiocelular de la pancitokeratină (8). Reacțiile imunohistochimice au fost evaluate folosind un microscop optic Nikon Optiphot-2 în 10 câmpuri vizuale cu mărire mare, selectate aleatoriu. Pe baza proporției de celule tumorale care prezintă un răspuns imun pozitiv, a fost utilizat următorul sistem de notare: 0 (negativ) = 0-5%; 1 = 5-30%; 2 = 30-50%; 3 = Rezultate

În timpul examinării carcasei de iepure, am observat dezvoltarea corespunzătoare vârstei și rasei, precum și starea de nutriție supraponderală. Membranele mucoase vizibile au fost mai palide decât în mod normal. În țesutul conjunctiv subcutanat, la locurile specifice speciei, am acumulat o cantitate mare de țesut adipos alb, care a fost observat într-o formă asemănătoare lipomului, rotunjită, simetrică în jurul gâtului (figura 1). În cavitatea abdominală s-au observat 15-20 ml de conținut roșiatic, lichid, liber. Picătura, mezenteriul, căptușeala uterină largă și zonele din jurul rinichilor au fost împletite cu țesut adipos abundent, alb-gălbui pal. În uterul stâng, în zona apropiată de ovare, s-a observat o masă de țesut gelatinos roșu-cenușiu, moale-tactil, cu diametrul de 3,5–4 cm, cu un diametru de 2 cm, 2 cm în diametru, într-un uter larg bandă bogată împletită cu țesut adipos. a fost un focar similar (Figura 2).

Au fost observate îngroșări neregulate ale mucoasei gelatinoase, pre-bombat circumscris și semne de sângerare în uterul stâng deschis, zona modificată (Figura 3). Pe suprafața cecului, am văzut focare solide de mei, de dimensiuni de mazăre, roșu-cenușiu, de asemenea gelatinoase, solide (Figura 4). În zona centrală a picurării, s-a observat o proliferare tisulară gelatinoasă, roșiatică, cu suprafață neuniformă, cu aspect anormal, care se infiltrează în abundentul țesut adipos alb (Figura 5). În plus, atrofia pancreasului și infiltrarea cu țesut adipos, precum și mărirea și ficatul gras difuz (Figura 6). În cavitatea toracică s-au observat 6-8 ml de acumulare de lichid roșcat, semne de descuamare epicardică și lobi pulmonari măriți, mai întunecați decât normalul, de culoare mai închisă.

Formula uterină stângă, la examenul histopatologic, s-a dovedit a fi celule fibroblastice tumorale cu creștere infiltrativă, formând o rețea de celule libere, în formă de stea și în formă de fus, prezentând semne de anizocarioză ușoară. Celulele tumorale au fost încorporate într-o matrice extracelulară (mucus) albastră pal, abundentă. În tumorile mezenchimale, un număr mare de microvase primare induse de tumori (Figura 7) și sângerări extinse și necroză de coagulare (Figura 8). Focurile parametrice au arătat un aspect tisular similar cu leziunea uterină. În probele prelevate din țesutul tumoral infiltrat prin picurare, s-a găsit o constatare histologică corespunzătoare tumorii mezenchimale uterine, cu toate acestea, angiogeneza secundară anormală a fost mai pronunțată aici (Figura 9), microtromboză multiplă, deces și hemoragie în turma lor (Figura 10). Un număr semnificativ de granulocite heterofile au fost detectate în lumenul microvaselor anormale formate în tumorile secundare (metastatice). Au fost observate semne de liponecroză extinsă în zonele infiltrate de tumora prin picurare (Figura 11).

Au fost observate degenerescențe grase necrobiotice însoțite de moartea celulelor parenchimatoase în ficat, atrofie în pancreas și lipomatoză (împletirea anormală a țesutului pancreatic cu țesutul adipos). Examenul histopatologic al plămânilor a relevat embolizarea tumorilor arteriale multiple (Figura 12) și în vasele mici, s-a observat microtromboză multiplă (Figura 13). Examenul cardiac a relevat acumularea de țesut adipos subepicardic și sângerări acute multifocale. Examenul histopatologic al creierului a evidențiat edem difuz, ușor, cortical, degenerescență neuronală multifocală și micropleșe perivasculară.

În imunohistochimia tumorală, celulele mixosarcomului au prezentat pozitivitate difuză, intensă (3), citoplasmatică a vimentinei (Figura 14), α-SMA, pancitokeratină și claudin-5 au fost negative. Sa constatat că indicele de proliferare Ki-67 este de 18%. Microvasculele intratumorale au prezentat semne de imunoreactivitate vimentină și claudin-5. Lipocitele intacte s-au dovedit a fi utile ca martori interni ai vimentinei.

Diagnosticul bazat pe constatare: paratumoral solitar din uterul stâng al unui iepure obez, plasat lângă acesta într-un ligament uterin larg, mixosarcom cu metastază îndepărtată în zona viscerală a peritoneului și a plămânilor. În ficat a fost observată degenerescență grasă necrotică anormală difuză însoțită de moartea celulelor hepatice (cetoza iepurelui).

Discuţie

A fost examinată carcasa unui iepure domestic de 4 ani, gri, mixt, de sex feminin. La animal, s-a observat miatosarcom de la uterul stâng, paratumoral la ligamentul uterin și metastaze îndepărtate la peritoneul visceral și plămân. Semnele de coagulopatie intravasculară diseminată (DIC, microtromboză) au fost, de asemenea, observate la animalul obez.

DIC este un sindrom trombohemoragic sistemic care este întotdeauna o boală secundară. Din punct de vedere clinic, se pot distinge formele sale acute și cronice. În timpul DIC, se dezvoltă micro- și macrotrombi, care provoacă leziuni severe ale organelor. Declanșatorii DIC pot fi de origine infecțioasă sau neinfecțioasă. Acestea din urmă includ DIC induse de leziuni canceroase (12). DIC (în principal forma cronică, compensată) a fost raportată la om în afecțiuni tumorale maligne extinse (plămâni, rinichi, prostată, sân și cancer gastrointestinal), cu afecțiuni maligne hematologice asociate în primul rând cu leucemii acute promielocitice și mielomonocitare (1). 3, 18).

În studiile lor, Maruyama și colab. Au găsit DIC la 12,2% din 164 de câini cu tumori maligne solide. În 35% din cazurile de hemangoizarcom, în 20% din câinii cu carcinom mamar, în 10% din animalele cu adenocarcinom pulmonar și nazal, la pacienții cu carcinom cu celule scuamoase, osteosarcom, carcinom gastric, tumoare cu celule granuloase și cortexul suprarenal 5 în% (13).

În cazul nostru, microtrombotarea observată în principal în plămâni s-ar fi putut dezvolta în mixosarcomul uterin și datorită sângerărilor extinse, necrozei și liponecrozei difuze în picătura debilitată cauzată de tumorile secundare din populația sa metastatică. În sângerarea din mixosarcomul primar și secundar al iepurelui, difosfatul de adenozină eliberat din celulele roșii din sânge și fosfolipidele de membrană ale globulelor roșii activează atât trombocitele, cât și coagularea intravasculară. Mediatorii chimici eliberați din granulocitele heterofile din zona tumorii moarte și a țesutului adipos, citokinele (de exemplu, interleukina-6, factorul de necroză tumorală-alfa), pot avea, de asemenea, o susceptibilitate crescută la DIC la iepurii canceroși. Majoritatea tumorilor produc o proteină care activează sistemul de coagulare, rezultând o tendință la tromboză și coagulopatie utilizată, o caracteristică a DIC (1, 3, 18). Se presupune că, în cazul nostru, proteinele patologice produse de celulele sarcom la iepurii de uxor mixosarcom au crescut, de asemenea, înclinația pentru DIC.

Nakano și colab. DIC experimentat asociat cu pancreatită, cetoză, cetoacidoză la un bărbat de 49 de ani (14). Pettersen și colab. Au găsit microtromboză a intestinului subțire la un pacient diabetic, ketotic (15). În absența datelor clinice și de laborator, putem presupune doar că steatoza hepatică anormală severă la iepurii obezi a fost o consecință a cetozei și că acesta din urmă ar fi putut crește înclinația animalului la tromboză.

O întrebare fundamentală în cazul nostru este dacă este vorba despre o tumoare spontană sau o leziune indusă de virus. În acest din urmă caz, rolul octologic al virusului leporipox poate fi ipotezat. Pentru a răspunde la întrebare, planificăm studii suplimentare, dintre care unele sunt de natură virologică (PCR). analize microscopice electronice.

Autorii doresc să mulțumească renumitei histotehnice Renáta Pop pentru munca pe gravură.