Diagnosticul de laborator al funcției hepatice Péter Vajdovich

Diagnosticul de laborator al funcției hepatice Péter Vajdovich http://www.naturopetic.com/liver-disease/ http://www.sporcle.com/games/sbme/histology-slideshow 1

Afectare hepatică Afectare celulară hepatică Colestază Hipoxie Boli metabolice Intoxicație Inflamare Tumoră Traumatism mecanic Bloc de căi biliare intrahepatice și extrahepatice Necroză celulară hepatică Hipoxie resp. leziuni toxice Lipidoză hepatică Hepatopatie steroidă Tulburări biliare Boală hepatică progresivă clinică Boală hepatică în stadiu final Lezare hepatică focală (de exemplu, tumoare) Șunt protosistemic 2

Necroză hepatocelulară Hipoxie resp. daune toxice Cauze: hepatită acută Toxine, de exemplu, tiacetarsamidă, anticonvulsivante Aflatoxină, endotoxină bacteriană, alge verzi albastre Bacteriene - Leptospira, Salmonella, Clostridia Viraladenovirus I (ICH), herpes canin Toxoplasmoza

Lipidoză hepatică Cauze: Lipidoză hepatică la pisici Anomalii nutriționale Hepatopatie steroidică Hepatopatie steroidă Cauze: Efect glucocorticoid endogen sau exogen Ficatul câinilor este deosebit de sensibil la glucocorticoizi. 4

Tulburări biliare Cauze: Colangită, colangiohepatită Colangită supurativă Lipidoză hepatică Hepatopatie steroidă Ciroză Pancreatită Tumoră 5

Boală hepatică progresivă clinică Cauze: Hepatită cronică Hepatită cronică progresivă-idiopatică, mediată imun? Bedlington Terriers, WHW Terriers toxicitate asupra cuprului Hepatita cu disecție lobulară Leptospiroză virală - adenovirus Indus de medicamente - primidonă, fenitoină Colangiohepatita supurativă Colangiohepatita nesupurativă (limfocitară) 6

Boala hepatică în stadiul final Ciroza Fibroza în stadiul final este sfârșitul multor boli hepatice inflamatorii. Motive in mare parte inexplicabile. http://www.meddean.luc.edu/lumen/meded/orfpath/images/fig85x.jpg http://research.vet.upenn.edu/systemicpathology/exam4/commonsmall AnimalLesions/tabid/3649/galleryType/SlideShow/ItemID/549/AlbumID/52 /Default.aspx 7

Leziuni hepatice focale Cauze: Tumori primare Carcinom hepatocelular Hepatom Colangiocarcinom Fibrom/fibrosarcom Haemangiom/hemangiosarcom Limfom (poate fi și multi-focal) Tumori metastatice Cancer de sân Cancer de sân Carcinom de prostată Limfom Hemangiosarcom

Opțiuni de testare a funcției hepatice într-un laborator de rutină Proceduri care pot fi utilizate pentru diagnosticarea și monitorizarea bolilor hepatice. Potrivit pentru: 1. Afecțiuni hepatocelulare (morfologice, procesele de deteriorare a membranei) 2. Colestază 3. Modificări ale funcției hepatice 12

Deteriorarea celulei hepatice https: //www.wisegeek.org%252fwhat-is-ascites.htm%3b1000%3b710 13

DETERIORAREA CELULELOR FICATE -O posibilitate de detectare este creșterea activității enzimelor care scapă din celulele hepatice deteriorate în plasma sanguină -Aceste studii indică parțial extinderea/severitatea daunelor Nu diferențiază între procesele reversibile și ireversibile și focal și difuz 14

Modificări enzimatice ale afectării hepatocelulare -Enzime eliberate de hepatocite deteriorate: Alanină aminotransferază (ALT) Aspartat aminotransferază (AST) Glutamat dehidrogenază (GLDH) Datorită disfuncției hepatice a sorbitol dehidrogenazei (SDH).

Localizare enzimatică în celula hepatică Leziune membranară Scurgere celulară Citoplasmă: ALT SDH AST (izoenzimă citosolică) AST GLDH Membrană celulară Legată de membrană: ALKP GGT Mitocondrii induse de colestatic 16

ALT SDH AST Nucleul celular Deteriorare subletală Citoplasmă: ALT SDH AST (izoenzimă citosolică) AST GLDH mitocondrii AST GLDH 17

ALT SDH AST Citoplasmă pentru necroză nucleară: ALT SDH AST (izoenzimă citosolică) AST GLDH mitocondrii AST GLDH 18

ALT ALANIN AMINOTRANFERASE Specific ficatului: câine, pisică Există masă musculară (hcs 5%, inimă 25% ficat) ? De asemenea, foarte sensibil Nu este potrivit pentru testarea bolilor hepatice la cai, porci, porci Nici o indicație a gravității bolii Inhibitorii SH (inhibitori ai ECA) reduc hemoliza crește icterul, reduce lipemia 19

ACTIVITATE ALT CREȘTĂ * hipoxie hepatică, perfuzie slabă, traume * hepatită cronică, ciroză, * colangită-colangiohepatită * obstr. Biliară acută. * necroză hepatică, tumoră * pancreatită, sepsis, toxine ALT în ref. Interval triplu superior (sever): Insuficiență hepatică HKP hepatopatie de 40x creștere!

ACTIVITATE ALT CREȘTĂ Daune acute: creștere după 12 ore, vârf după 1-2 zile Timp de înjumătățire (unele de la 60 la 60 de ore) câine, mai scurt decât pisica Cal, bovine - scăzut, de asemenea la nivelul mușchilor.

AST ASPARTATE AMINOTRANFERASE mușchi și ficat la toate speciile Citoplasmă și mitocondrie (ubiquiter) Adecvat în special pentru detectarea leziunilor hepatice la animale mari Foarte mult în mușchi, vvs Specificitate scăzută (mușchi !) Sensibilitate ridicată

CAUZE DE ACTIVITATE AST CREȘTĂ -Deteriorarea ficatului -Deteriorarea mușchilor -Măsurarea creatin kinazei (CK) este justificată -Hemoliza Timpul de înjumătățire plasmatică este mai lung decât timpul de înjumătățire CK 180 Câini: 5 ore Pisici: 1-2 ore Cai: 50 ore 160 140 120 100 80 60 AST CK 40 20 0 01 12 2 24 3 364 485 60 6 72 7 23

SDH SORBIT DEHIDROGENAZA ficat la toate speciile Citoplasma Stabil la temperatura camerei timp de 5 h, congelat timp de 48 h (pb 72 h). Potrivit în special pentru detectarea leziunilor hepatice la animalele mari Timp de înjumătățire 20xURL Osteosarcom Vindecarea oaselor (posibil) Hipertiroza (pisică) http://www.siumed.edu/

modelul dking2/ssb/re.htm 33

LALP Nucleul celular Citoplasma: ALT SDH AST AST GLDH Membrana celulară Membrană legată la: ALKP GGT (izoenzimă citosolică) Legată la membrană: ALKP GGT mitocondrii 34

ACTIVITATE LALP Izoenzima colestazei (solubilizare capilară biliară) Câine de înjumătățire: 72 h, pisică: 6 h Br, acidul biliar indică, de asemenea, umflarea celulelor poate provoca http://en.wikipedia.org/wiki/cholestasis#/media/file: cholestasis_high_ma g. jpg 35

ACTIVITATEA CIALP Inducție glucocorticoidă Câine de înjumătățire: 72 h Endogen, v. efect exogen Br, acidul biliar indică și umflarea celulelor poate provoca efect Gluc> 20x URL poate fi 36

ACTIVITATEA CIALP Inducție glucocorticoidă Câine de înjumătățire: 72 h Endogen, v. efect exogen Br, acidul biliar indică și glucoza, activitatea LALP crește în prima săptămână de administrare Activitatea CiALP crește din a doua săptămână 37

CiALP Glucocorticoid ALP (izoenzimă citosolică) Nucleul celular Citoplasmă: ALT SDH AST AST GLDH (izoenzimă citosolică) Legată de membrană: ALKP GGT Legată de membrană: ALKP GGT mitocondrii 38

Inducția glucocorticoidelor ALP ACTIVITATE efect de inducție Inducția anticonvulsivantă (fenobarb., Fenitoină, primidonă) (limita superioară a valorii de referință 10x) și Br crește, de asemenea, colestaza cauzează 40

ACTIVITATE ALP CREȘTĂ - URL ALP 5x, Scottish Terrier 15xURL -ALP> aprox. 10 x URL Obstrucție biliară 41

ALP: DIFERENȚE RACIALE Pisici: scurte T 1/2 (mai scurte decât la câini: doar 6 ore, în timp ce la câini 3 zile Creșteri ușoare pot fi semnificative la pisici (colestază, hipertiroidism/dar glucoză . nu ! /) Hipertiroidism) 80 % BALP, LALP 20 µmol/l -Mucoasa este galbenă dacă TBR> 50 Rmol/l CAI/SZHA: Plasma este adesea galbenă chiar și la animalele sănătoase 52

Br crescut: la diferite specii de animale Hiperbilirubinuria la câini ocazional mai devreme decât hiperbiliribinemia Excreție mai rapidă la câini Tmax mic, BrII reabs. greu în Cal: înfometare, colest. - Br femeie, hemizisul poate da valori Br de 10x (mut. Conj. Enzymopath Sindrom Crigler-Najjar) în Szm: înfometare, colest și cânepliză Br femeie în ovine: mutație Br hepatoc. Aportul a scăzut (boala Gilbert) a scăzut Br-excr. (Sindromul Dubin-Johnson) 53

Bilirubină totală crescută la câini și pisici GALBEN PREHEPATIC (hemolitic): producție crescută, absorbție scăzută (tulburări circulatorii, scăderea hepatocitelor, scăderea absorbției Br și conjugare Retenție hiperbilirubinemie 64-136 ore după înfometare) (FFA-Br retenție BrI, regurgitare BrII Hematologie justificat 54

Bilirubină totală crescută la câini și pisici GALBENE HEPATICE: leziuni hepatocelulare și, respectiv, colestază. retenție Br-anemie Testele funcției hepatice sunt justificate: colestază asociată sepsisului (fără obstr.) TNF, IL-6, IL-1β - inhibă transportul Br GALBENEȚE POSTEPATICE: Studiile privind colestaza justifică creșterea ALP, GGT mai devreme 55

Cocker spaniel în vârstă de 4 ani, bărbat, icter, poziție culcat, letargie, splină și ficat mărite, urină galben închis 66

fecale hipercrom (pleichrom) 70

autoaglutinare, leucocitoză 71

Testul Gmelin urină, urină Bilirubină, verdin UBG HNO 3 1 oră, 1 oră mai târziu proaspătă, proaspătă 74

infiltrare lipotică, regenerare hepatică colestază 75

TESTE DE FUNCȚIE A FICATULUI 76

DISFUNCȚIE HEPATICĂ Stare anormală datorată afectării funcției celulelor hepatice Apare în boala hepatocelulară, din cauza hipoplaziei/atrofiei hepatice sau a colestazei 77

TESTE DE FUNCȚIE A FICATULUI Bilirubina (de asemenea, în caz de colestază, vezi mai sus) Acizi biliari Amoniac 78

ACIZI EPARICI, ES Circulație enterohepatică! Acizi grași primari: glicină Acizi grași secundari: Acid deoxicolic Acid litocolic Fecale 79

DETECȚIA ACIDULUI EPESIC SER (ES) Evaluează absorbția hepatică a acidului biliar din circulația portală Testul funcției hepatice ES seric ridicat: funcția hepatică indică tulburări sau șunt portosistem Laborator: Hemoliza reduce creșterea lipemiei Intră puțin în fluxul sanguin mare Sinteza minimă ES portae Biliary G.I.T. Pierderi minime cu fecale 80

SERUM-ES (BA) DETECȚIE Cauză: Disfuncție hepatocelulară Șunt sistemic portal Monitorizarea tratamentului Excluderea hemolizei (Br, enzimele au un conținut ridicat de hem, ES nr. Cauze de creștere: Leziuni ale țesutului hepatic Șunt hepatocitar sânge Enterohepeg redus a. 81

DETECȚIA SERULUI DIN SER, NU DIN PLASMĂ Postul ES (după 12 ore de foame) Motivul creșterii: Icter Hiperadrenomorticism Lipemie Pancreatită Pancreatită Congestie pancreatică

Testul ES pre și postprandial (PPBA) la câini este cel mai precis diagnostic. test Eșantion preprandial după 12 ore de înfometare (5-20 µmol/l) Eșantion postprandial la 2 ore după hrănire (grăsime din dietă de creștere, de exemplu ulei de porumb în 5% din substanță uscată) (25 µmol/l) Interpretare: crescută (> 5 - 20 µmol/l) foamete ES = disfuncție hepatică; sau> 20 olmol/l PSS PPBA crescut (> 25 umol/l) PSS, colest., cir., necroză, hepatită, hep. lipidoză, gluc. hepatopat., tumoarea PPBA exclude în domeniul fiziologic: prezența PSS la pacienții cu ES la jeun în domeniul fiziologic 83

Testul postprandial ES (PPBA) Ajută pisicile după alte teste ale funcției hepatice: eșantion postprandial la 2 ore după hrănire Interpretare: ES preprandial scăzut, fără diagnostic. PP-BA crescut: = PSS, lipidoză, colestază PPBA la câini și pisici poate fi mai mică decât în starea de post: contracție spontană a vezicii biliare care poate fi determinată o creștere a postului ES 84

Test ES la animale mari Bovine: 27-323 µmol/l (lact. Vârf 18-79 µmol/l) Post (14 ore de post): 3-31µmol/l după hrănire poate fi de 60 µmol/l din oră în oră. La cai, în medie 20 µmol/l, foamea (3-4 zile) poate crește la 25 µmol/l Necroză hepatică, lipidoză, neopl., Cirrh. 40-100 umol/l 85

Urină ES (Acidul biliar urinar, UBA) La câini: UBA/Crea spec: 100%, sens.: 63% - pentru boli hepatice la pisici. Specificații UBA/Crea: 88%, sens .: 87% - pentru boli hepatice 86

Scăderea ES Scăderea golirii gastrice Intestin mai lung. timpul de tranzit Ileum malabsorbție http://www.tritolonen.fi/index.php?page=articles&id=164 87

AMONIA - Bacteriile GI formează amoniac - Amoniacul pătrunde în ficat (circulația portalului) - Ciclul ureei din ficat transformă amoniacul în uree - Detoxifierea nereușită poate provoca hiperamoniemie și simptome ale sistemului nervos Tak. proteine AMONIA Ficat UREA (uree) Bacterii intestinale 88

MĂSURAREA AMONIEI DE SÂNGE Amoniacul este foarte volatil, instabil în probă. (vvs conțin de 8 ori mai mult amoniac ca plasma) Recoltare de sânge de amoniac după 8 ore de înfometare EDTA v. sânge de heparină fără amoniac. Depozitat într-o baie de gheață și separarea plasmei în 30 de minute (altfel fals ridicat) stocat la 0-5 o C, plasma trebuie măsurată în 60 de minute ! Congelarea provoacă o creștere falsă ! Măsurare: Măsurarea plasmei în 30 de ore (altfel creștere falsă.) 89

SCHIMBAREA AMONIEI DE SÂNGE Cauzele amoniacului cresc Disfuncția hepatică (deteriorarea cu 60% a funcției hepatice) Șunt post-sistemic Enzimopatie congenitală în ciclul ureei (rară) Toxicoza ureei (rumegătoare) Expunere (cai, câini) Boală intestinală (cai) până la encefalopat. cu simptome lup irlandez (moștenesc cantități mari, dar PSS este, de asemenea, obișnuit) 90

TEST DE TOLERANȚĂ A AMONIEI 0 minute probă de sânge postprandială 20 mg/ml NH3Cl prin gavaj la o doză de 100 mg/kg (maxim 3 g) probă de sânge de 30 de minute după administrare Normal: 30 minute după administrare NH3 cc. 2-2,5x mai mult de 10x valori mai mari în 0 minute PSS. 91

SELECȚIA Vopselelor din ficat Proceduri mai puțin utilizate de la detectarea acidului biliar Deoarece determinarea este simplă, este adecvată în laboratoarele în care acidul biliar nu este măsurat Bromosulfaleină (BSP) (alb. Se leagă, conj. Verde (ICG) (alb., Β- legarea lipoproteinelor, diagnostic neconjugat: aport de sânge hepatic, excreție de celule hepatice) v Esența lor: colorantul administrat iv este excretat de ficat. După un anumit timp (T 1/2) poate fi detectat în sânge cantitatea caracterizează funcția ficatului

Alte modificări observate în afecțiuni hepatice Anemie coagulopă - sângerări cauzate de boli cronice și. non reg. PSS: microcit., Hipocr.) Coagulopatie (K-vit. Malabs., Coag. Factori/I, II, V, VII, IX, X/scădere) PTI, APTI până la normă. valoare sub 30% Deteriorarea fibrinolizei - anticoagulant. proteina C și S malabs. Tulburare: APTI, PTI, activitate antitrombinică, activitate proteină C, concentrat fibrinogen. și trombocitopenie, patologie 93