Boală cauzată de Brucella canis la câini și prima dată diagnosticată în Ungaria

(Bruceloză canină și prima depistare a Brucella canis în Ungaria

Boala cauzată de Brucella canis la câini poate provoca daune economice semnificative raselor. Infecția adesea asimptomatică este indicată de avorturi în efectiv, infertilitate la ambele sexe, inflamație, umflături sau uneori atrofie a organelor genitale. B. canis poate infecta și oamenii, zoonoză. Prezența B. canis în Ungaria nu a putut fi confirmată decât în 2009. În cadrul anchetei efectuate între 2001 și 2002, examinarea serologică a probelor de sânge a 1153 de câini din diferite părți ale Ungariei s-a încheiat cu un rezultat negativ (10).

Proprietarul unei rase de câini din Ungaria se confruntă cu o serie de avorturi spontane în efectivul său din octombrie 2008. În iulie 2009, doi fetuși avortați și o teacă fetală au fost trimiși pentru examinare instituțională din care a fost crescut B. canis (18). În articolul nostru, oferim o revizuire literară a brucelozei canine și prezentăm pe scurt prima epidemie internă de B. canis.

Bruceloză a câinelui

Incidenţă

Bruceloză canină apare la nivel mondial. Toate speciile din familia Canidae pot fi rezervoare de B. canis. Avorturile epidemice la câini au fost observate pentru prima dată în 1963 (37), dar agentul patogen a fost izolat abia în 1966 (5). Agentul patogen apare în Europa; De asemenea, a fost detectat în Germania (41), Spania (29), Italia (9), fosta Cehoslovacia (30), Polonia (27) și Franța (12).

Patologie

În prezent, există zece specii diferite în genul Brucella: B. melitensis (capre și oi), B. abortus (bovine și bizoni), B. suis (în principal porci, dar și rozătoare, iepuri și reni), B. ovis (oi), B. canis (câine), B. neotomae (șobolan deșert), B. ceti (cetacee), B. pinnipediales (focă, morsă), B. microti (câmpuri) (23), B. inopinata (o boală umană) ) izolat în timpul). În cadrul fiecărei specii, se consideră un număr de biotipuri care diferă prin caracteristicile lor fenotipice, cum ar fi cererea de CO2, producția de H2S, sensibilitatea la coloranți și fagi (1, 24).

Dintre membrii genului Brucella, din câte știm, câinele poate fi infectat doar de patru specii (B. canis, B. suis, B. melitensis, B. abortus), dar dintre acestea, numai B. canis are semnificație epidemiologică (22, 37).

B. canis, la fel ca alte specii de Brucella, este un agent patogen intracelular cu colorare moderat rezistentă la acid și alcool (Köster pozitiv), Gram-negativ, coccoid. Pe un mediu care conține sânge, după 48 de ore de cultură, formează colonii cu o morfologie galben-cenușie, accidentată (R), cu diametrul de 0,5-2 mm (Fig. 1). Catalază, oxidază și urează pozitivă, nu necesită CO2, nu produce H2S (1, 3). Rezistența sa este medie, supraviețuiește în mediu câteva zile.

Epidemiologie

Câinii pot fi infectați cu B. canis la orice vârstă. Cel mai comun mod de transmitere sexuală este (19, 37). Agentul patogen este excretat în secrețiile vaginale ale cățelelor în timpul estrului și al sarcinii. După naștere, B. canis poate fi detectat și la descendenți, fătul avortat, placenta și plicurile fetale la o concentrație de până la 1010 unități formatoare de colonii (TFE)/ml (6). La câinii masculi, infecția se răspândește în principal prin material seminal. Secrețiile de prostată și epididimale pot conține cantități mari de agent patogen, în special în primele două luni de infecție. Excreția bacteriană, deși într-un grad în scădere, poate persista ani de zile fără ca câinele să prezinte simptome. Bărbați și femele la 4 până la 8 zile după infecție. începând din săptămână, bacteria poate fi, de asemenea, excretată în urină, care poate atinge peste 103-106 TFE/ml în urina bărbaților (33). Laptele unei cățele infectate poate conține, de asemenea, cantități mari de agent patogen. Unii cred că puii sunt deja infectați în uter (6), în timp ce alții consideră că infectarea puilor cu lapte este primară (39). Bacteria a fost, de asemenea, izolată de salivă, secreții nazale și oculare și fecale, dar acestea sunt de o importanță minoră pentru răspândirea bolii (39).

Dezvoltarea bolii

Bacteriile intră în organism prin membranele mucoase sau conjunctive ale organelor genitale, gurii și nasului. Agentul patogen este apoi ingerat de macrofage, care ajung la organele limfoide (ganglioni limfatici, splină), țesuturile organelor genitale dependente de steroizi (prostată, testicul și epididim la câinii masculi și uterul, placenta și fătul gravid la cățele), unde se înmulțește. Bacteremia este de 1 până la 4 zile după infecție. se dezvoltă în aproximativ o săptămână, durează aproximativ șase luni, dar bacteremia intermitentă poate dura ani de zile (19, 37). Bacteria se poate așeza în ochi și chiar în cartilajul dintre vertebre (6).

Simptome, leziuni

Deși bacteria este prezentă în organism și se înmulțește, infecția este adesea asimptomatică sau se manifestă doar ca simptome ușoare. Mortalitatea este scăzută, mai ales la puii vii, dar infectați. Proprietarii raportează uneori doar semne ușoare, incerte, cum ar fi pierderea în greutate, deteriorarea calității părului, indiferența, oboseala, durerile de spate, șchiopătarea, ganglionii limfatici măriți (în special în zona inghinală și în spatele faringelui). Un simptom clasic este avortul spontan la cățele care, de obicei, se încadrează între 30 și 57 de zile de sarcină (19, 37). Avorturile spontane sunt adesea parțial autolizate. O descărcare maronie, cenușie-verzuie poate fi excretată din vaginul unei cățele avortate pentru o perioadă lungă de timp (8). Deșeurile se pot naște și în cazul în care puii sunt slabi și mor în câteva ore. În multe cazuri, descendenții sunt deja uciși și absorbiți la vârsta embrionară, astfel încât cazul este considerat o împerechere eșuată.

La câinii masculi, în cazul unei infecții acute, epididimul devine mărit și dureros din cauza inflamației. Inflamarea scrotului și infiltrarea edematoasă sunt frecvente. Datorită durerii, libidoul acestor animale scade, iar zona inflamată este adesea linsă. În faza cronică a bolii, epididimul se ofilesc. Inflamația purulentă a testiculului și a scrotului este mai puțin frecventă (19, 37). Bacteriile care se înmulțesc în testicul pot deteriora celulele de acolo și bariera hemato-testiculară, rezultând în 11 până la 14 zile după infectare. săptămână, organismul produce anticorpi împotriva spermei. Acest lucru determină o creștere a inflamației locale, spermatozoizi anormali și autoaglutinare a capului lor (31).

Anomaliile se pot dezvolta și în alte părți ale corpului. Pe lângă inflamația generalizată a ganglionilor limfatici datorată proliferării difuze a celulelor limfoide și reticuloendoteliale, s-a observat și mărirea splenică și hepatică. În cazurile mai severe, poate apărea rigiditate, șchiopătare, paralizie unilaterală sau chiar completă din cauza unei posibile discospondilita. Endoftalmita se poate dezvolta și din cauza complexelor imune rezultate (19, 37).

Indicație medicală

B. canis poate fi cultivat atât din material seminal, cât și din secreții vaginale în timpul estrului și după avorturi (19, 37). Agentul patogen este prezent în cantități mari în plicul fetal, dar poate fi detectat și în urină (32) și poate fi cultivat din probe obținute din ganglioni limfatici, prostată, splină, măduvă osoasă, uneori ficat, testicul (40). Examinarea sângelui într-un sistem închis care este inhibat de coagulare dă numai rezultate în timpul bacteriemiei. În cazul unui test bacteriologic negativ, infecția animalului nu poate fi exclusă cu certitudine completă (19, 37). Testele biochimice și metodele moleculare (reacția în lanț convențională și în timp real a polimerazei în lanț (PCR)) sunt utilizate pentru a separa speciile și biotipurile individuale de Brucella (13, 23).

Testele serologice pot detecta anticorpii la peretele celular și/sau proteinele citoplasmatice din brucele. Anticorpii apar în cantități detectabile la 3-4 săptămâni după infecție, dar sunt adesea nedetectabili în faza cronică a bolii (21, 40). Cele mai frecvente teste serologice sunt testul de aglutinare cu diapozitive (7, 14), testul de aglutinare a tubului, [ambele cu sau fără adăugarea de 2-mercaptoetanol (crește specificitatea, scade sensibilitatea)], precipitarea gelului de agar (42), ELISA ( 2)., 26, 36) și se utilizează imunofluorescența indirectă (19). Testele enumerate, deși diferite în sensibilitate și specificitate, se completează bine.
O indicație clară poate fi obținută prin cultivarea bacteriei și testarea serologică a două probe de sânge luate la distanță de 4 săptămâni. Pentru examinarea bacteriologică, fătul avortat și învelișul fetal, în cazul cățelelor, trebuie prelevat un tampon vaginal și o probă de sânge (sistem închis, anticoagulat), iar în cazul câinilor masculi, o probă de spermă și sânge (sistem închis, anticoagulat) trebuie trimise pentru examen de laborator.

Boală distinctivă

Infecția câinilor cu herpesvirus, Mycoplasma spp., Ureaplasma spp., Escherichia coli, Streptomyces spp., Salmonella Enterica, Campylobacter spp., Coxiella burnetii, Leptospira spp., Neospora caninum, Toxoplasma gondii.

Prevenire și control

Infecția cu B. canis la câini este o boală care trebuie notificată în Ungaria [12/2008. (II. 14.) Decret MARD]. Dacă prezența infecției cu B. canis la un câine într-un efectiv de reproducere a fost confirmată printr-un test de laborator, ar trebui să se impună o restricție de trafic rasei infectate. Restricția de trafic poate fi ridicată numai dacă efectivul a fost eliminat de către deținător și dezinfectat sau efectivul a fost eliminat de B. canis. Canisa poate fi declarată liberă în cazul în care semnele clinice ale brucelozei canine nu au apărut în decurs de un an înainte de clasificare, iar testele serologice efectuate de două ori la câinii non-sterilizați cu vârsta mai mare de un an cu un interval de cel puțin trei luni au fost negative.

Aspecte de sănătate publică

La om, boala cauzează de obicei simptome nespecifice, cum ar fi febră prelungită, ganglioni limfatici măriti (34), dureri în gât (35), dureri articulare (16), frisoane și pierderea în greutate (25). Agenții infecțioși și contactul strâns cu animalele infectate joacă un rol în transmiterea infecției (20).

Primul diagnostic intern de B. canis (18)

În timpul examinării bacteriologice a tampoanelor de sânge, vaginale și gât colectate de la 31 de animale la sfârșitul lunii iulie, B. canis a fost cultivat din 3 animale (10%): din proba vaginală și de sânge a cățelei avortate (numărul 1) agent patogen) și din sângele unui mistreț de reproducție (numărul 2) și al unei cățele de jumătate de an (numărul 3) (Tabelul 2). Gâtul și probele de sânge suplimentare au fost negative. În timpul eșantionării la sfârșitul lunii august, cu excepția câinelui numărul 3, cultura probelor de sânge s-a încheiat cu un rezultat negativ. Dintre cele șase animale anesteziate la sfârșitul lunii august și supuse unor teste diagnostice extinse (găsite pozitive în cele trei teste bacteriologice (cazurile 1 până la 3) și încă trei infecții suspectate (cazurile 4 până la 6)), 2 și la câinii numărul 3, agentul patogen ar putea fi cultivat din organe parenchimatoase și ganglioni limfatici.

În luna iulie, testul de aglutinare cu lamele specifice B. canis a fost pozitiv pentru câinii 1-4 și 7-8. După tratamentul cu 2-mercaptoetanol, doar probele 1-3 și 7 au fost pozitive. La sfârșitul lunii august, probele de la câinii 1, 3 și 9 au dat o reacție pozitivă la testul de aglutinare (atât după cât și fără precipitații cu 2-mercaptoetanol).

Examinarea post-mortem a făturilor, placentei și animalelor anesteziate prezentate nu a evidențiat leziuni macroscopice. Examenul histologic a evidențiat hepatită interstițială limfohistiocitară difuză la un făt (Fig. 2). Moartea tisulară a coagulării multifocale cu macrofage moderate și infiltrare puternică de granulocite neutrofile a fost observată în plicurile fetale și s-au detectat cantități mari de B. canis în celulele trofoblaste (Fig. 3). La toți cei șase câini examinați patologic, amigdalele și ganglionii limfatici au prezentat hiperplazie limfoidă. În plus, meningita limfohistocitică multifocală ușoară, pneumonia interstițială și inflamația mamară, endometrita și epididimita și prostatita limfohistocitice bilaterale difuze au fost, de asemenea, găsite la indivizi individuali (Fig. 4). Analiza PCR a omogenatului tisular al celor șase animale a relevat agentul patogen numai în țesuturile câinelui numărul 3, în timp ce în IH numai B. canis a fost detectat în citoplasma macrofagelor și a celulelor gigantice situate în amigdalele și ganglionii limfatici ai câinelui numărul 1 .

Am emis ipoteza că infecția cu B. canis a intrat în cultură cu cățea gravidă numărul 6 de origine necunoscută. Deoarece tulburările de reproducere sporadice observate au fost suspectate în principal de cauze neinfecțioase, proprietarul a trimis o probă doar pentru teste de laborator pentru prima dată după 8 luni. Într-un caz raportat recent, a trecut un timp similar (1 an) între apariția tulburărilor de reproducere în canisa și prima trimitere a probelor de laborator (4). Ambele cazuri atrag atenția medicilor veterinari și a crescătorilor care lucrează în practică asupra necesității de a căuta boli infecțioase pe fondul unor tulburări reproductive sporadice.

Dintre câinii testați, testul de aglutinare cu diapozitive a dat cel mai mare rezultat pozitiv. Similar cu altele, infecția subclinică a fost găsită la 57% dintre animalele găsite pozitive (19, 37).

Având în vedere că anticorpii detectabili prin testele serologice actuale apar doar la 3 până la 4 săptămâni după infecție, dar pot scădea sub nivelurile detectabile în faza cronică a bolii (21), nu este surprinzător faptul că unele probe de ser sunt negative prin testul de aglutinare cu diapozitive. volt. În ciuda culturii bacteriene de succes, câinele masculin 2 s-a dovedit, de asemenea, seronegativ. Starea serologică, cu excepția a doi indivizi, a variat în timp. Una a fost o cățea avortului nr. 1, cealaltă a fost un cățeluș de 5 luni care a supraviețuit dintr-un așternut nr. 3, parțial mort. Bacteremia a fost persistentă doar la acest pui. Din câte știm, acesta este primul caz care, probabil, a confirmat apariția bacteriemiei persistente B. canis la un câine tânăr care s-a infectat la naștere și altfel părea să fie complet sănătos. Acest rezultat atrage atenția asupra faptului că animalele tinere dintr-o canisa infectată care nu au fost încă crescute, indiferent dacă sunt vândute ca animale de companie sau ca animale de reproducție, pot prezenta un risc serios pentru oameni sau animale. la alte adăposturi.

Mai puțin de jumătate dintre animalele serologic pozitive au reușit să cultive B. canis, ceea ce poate fi explicat prin bacteremie intermitentă. Leziunile histologice găsite la câini și în teaca fetală, precum și rezultatele IH, au fost similare cu cele descrise în rapoartele anterioare (4, 15, 17, 19). La doi câini (numerele 5 și 6), numai istoricul medical și modificările histologice au indicat infecția. Toate celelalte teste au fost negative.

Datorită dificultăților de diagnostic descrise, eliberarea turmei mari nu promitea un anumit succes, așa că proprietarul a lichidat turma.

Pe baza studiilor noastre, am constatat că infecția cu B. canis la câini apare și în Ungaria. Prin urmare, se recomandă efectuarea unui test bacteriologic și serologic pentru a exclude infecția cu B. canis la avorturi la câini.